Amidase (AMD)
Enzimas:Os catalisadores biológicos macromoleculares, em sua maioria enzimas, são proteínas.
Amidase:Catalisam a hidrólise de diversas amidas alifáticas e aromáticas endógenas e exógenas, transferindo um grupo acila para a água com a produção de ácidos livres e amônia. Os ácidos hidroxâmicos e outros ácidos orgânicos são amplamente utilizados como fármacos por serem constituintes de fatores de crescimento, antibióticos e inibidores tumorais. As amidases podem ser divididas em acilases do tipo R e do tipo S, de acordo com a estereosseletividade do catalisador.
Além de catalisar a hidrólise de amidas, a amidase também pode catalisar reações de transferência de acila na presença de co-substratos como a hidroxilamina.
As amidases de diferentes origens apresentam especificidade de substrato distinta; algumas hidrolisam apenas amidas aromáticas, outras apenas amidas alifáticas e outras ainda hidrolisam α- ou ω-aminoamidas. A maioria das aminas apresenta boa atividade catalítica apenas para amidas acíclicas ou aromáticas simples, mas para amidas aromáticas complexas e heterocíclicas, especialmente amidas com substituintes orto, a atividade é geralmente baixa (apenas algumas enzimas exibem melhores efeitos catalíticos).
Mecanismo catalítico:
| Enzimas | Código do produto | Código do produto |
| Pó de enzimas | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | um conjunto de 19 amidases, 50 mg cada 19 itens * 50 mg / item, ou outra quantidade |
| Kit de triagem (SynKit) | ES-AMD-1900 | Conjunto de 19 amidases, 1 mg cada (19 itens * 1 mg/item) |
★ Alta especificidade de substrato.
★ Forte seletividade quiral.
★ Alta eficiência de conversão.
★ Menos subprodutos.
★ Condições de reação brandas.
★ Ecologicamente correto.
➢ A triagem de enzimas deve ser realizada para substratos específicos devido à especificidade do substrato, a fim de obter uma enzima que catalise o substrato alvo com o melhor efeito catalítico.
➢ Nunca entre em contato com condições extremas, tais como: alta temperatura, pH alto/baixo e solventes orgânicos em alta concentração.
➢ Normalmente, o sistema de reação deve incluir substrato e solução tampão (pH ótimo da reação enzimática). Co-substratos como a hidroxilamina devem estar presentes no sistema de reação de aciltransferase.
➢ O AMD deve ser adicionado por último ao sistema de reação, com pH e temperatura de reação ideais.
➢ Todos os tipos de AMD possuem diferentes condições ótimas de reação, portanto, cada um deles deve ser estudado individualmente.
Exemplo 1(1):
Atividade de hidrólise para diferentes substratos de amida
| Substrato | Atividade específica μmols min-1mg-1 | Substrato | Atividade específica μmols min-1mg-1 |
| Acetamida | 3,8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| Propionamida | 3,9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Lactamida | 12,8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramida | 11.9 | p-NH2benzamida | 0,8 |
| Isobutiramida | 26.2 | ο-Toluamida | 0,3 |
| Pentanamida | 22.0 | p-Toluamida | 8.1 |
| Hexanamida | 6.4 | Nicotinamida | 1.7 |
| Ciclohexanamida | 19,5 | Isonicotinamida | 1.8 |
| Acrilamida | 10.2 | Picolinamida | 2.1 |
| Metacrilamida | 3,5 | 3-Fenilpropionamida | 7.6 |
| Prolinamida | 3.4 | Indol-3-acetamida | 1.9 |
| Benzamida | 6,8 |
A reação foi realizada em solução tampão de fosfato de sódio 50mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| Amidas | Hidroxilamina | Hidrazina |
| Acetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamida | 18,4 | 3.0 |
| Isobutiramida | 25,0 | 22,7 |
| Benzamida | 9.2 | 6.1 |
A reação foi realizada em solução tampão de fosfato de sódio 50mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentração dos reagentes utilizados: amidas, 100 mM (benzamida, 10 mM); hidroxilamina e hidrazina, 400 mM; enzima, 0,9 μM.
Exemplo 2(2):
Exemplo 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremófilos, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Química Bioorgânica, 2017, Disponível online 7.
