Amidase (AMD)
Enzimas:São catalisadores biológicos macromoleculares, a maioria das enzimas são proteínas
Amidase:Catalisa a hidrólise de várias amidas alifáticas e aromáticas endógenas e estrangeiras, transferindo um grupo acil para a água com a produção de ácidos livres e amônia.Os ácidos hidroxâmicos e outros ácidos orgânicos são amplamente utilizados como fármacos por serem constituintes de fatores de crescimento, antibióticos e inibidores de tumores.As amidases podem ser divididas em acilases do tipo R e do tipo S de acordo com a estereosseletividade do catalisador.
Além de catalisar a hidrólise de amidas, a amidase também pode catalisar reações de transferência de acila na presença de co-substratos como a hidroxilamina.
As amidases com diferentes fontes têm especificidade de substrato diferente, algumas delas podem apenas hidrolisar amidas aromáticas, algumas delas podem apenas hidrolisar amidas alifáticas e algumas hidrolisam α- ou ω-aminoamidas.A maioria das aminas tem boa atividade catalítica apenas para amidas acíclicas ou aromáticas simples, mas para aromáticos complexos, amidas heterocíclicas, especialmente amidas com substituintes orto, são geralmente de baixa atividade (apenas algumas enzimas exibem melhores efeitos catalíticos).
Mecanismo catalítico:
| Enzimas | Código do produto | Código do produto |
| Enzima em pó | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | um conjunto de 19 amidases, 50 mg cada 19 itens * 50mg/item, ou outra quantidade |
| Kit de triagem (SynKit) | ES-AMD-1900 | um conjunto de 19 amidases, 1 mg cada 19 itens * 1mg / item |
★ Alta especificidade do substrato.
★ Forte seletividade quiral.
★ Alta eficiência de conversão.
★ Menos subprodutos.
★ Condições de reação suaves.
★ Ambientalmente amigável.
➢ A triagem enzimática deve ser realizada para substratos específicos devido à especificidade do substrato e obter uma enzima que catalisa o substrato alvo com melhor efeito catalítico.
➢ Nunca entre em contato com condições extremas como: alta temperatura, pH alto/baixo e solvente orgânico com alta concentração.
➢ Normalmente, o sistema de reação deve incluir substrato, solução tampão (o pH ótimo de reação da enzima).Co-substratos como a hidroxilamina devem estar presentes no sistema de reação de transferência de acil.
➢ AMD deve ser adicionado por último no sistema de reação com pH e temperatura de reação ideais.
➢ Todos os tipos de AMD têm várias condições de reação ótimas, portanto, cada um deles deve ser estudado individualmente.
Exemplo 1(1):
Atividade de hidrólise para diferentes substratos de amida
| Substrato | Atividade específica μmols min-1mg-1 | Substrato | Atividade específica μmols min-1mg-1 |
| Acetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1,4 |
| Propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Lactamida | 12,8 | ο-NH2benzamida | 1,0 |
| Butiramida | 11,9 | p-NH2benzamida | 0,8 |
| Isobutiramida | 26.2 | ο-Toluamida | 0,3 |
| Pentanamida | 22,0 | p-Toluamida | 8.1 |
| Hexanamida | 6.4 | Nicotinamida | 1,7 |
| Ciclohexanamida | 19,5 | Isonicinamida | 1,8 |
| Acrilamida | 10.2 | Picolinamida | 2.1 |
| Metacrilamida | 3,5 | 3-fenilpropionamida | 7.6 |
| Prolinamida | 3.4 | Indol-3-acetamida | 1,9 |
| Benzamida | 6,8 |
A reação foi realizada em solução tampão de fosfato de sódio 50mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| Amidas | Hidroxilamina | Hidrazina |
| Acetamida | 8.4 | 1,4 |
| Propionamida | 18,4 | 3,0 |
| Isobutiramida | 25,0 | 22,7 |
| Benzamida | 9.2 | 6.1 |
A reação foi realizada em solução tampão de fosfato de sódio 50mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentração do reagente relacionado: amidas, 100 mM (benzamida, 10 mM);hidroxilamina e hidrazina, 400 mM;enzima 0,9 μM.
Exemplo 2(2):
Exemplo 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremófilos, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Química Bioorgânica, 2017, Disponível online 7.
